克侖特羅膠體金試紙卡——瘦肉精三項檢測
1 檢測原(yuan)理
克(ke)倫特羅膠體(ti)金試紙卡應(ying)用(yong)了競爭抑制免疫層析的原理,樣(yang)本中的克倫特(te)羅(luo)在流動過程中與膠體(ti)金標記的特異性(xing)單克(ke)隆抗(kang)體(ti)結合(he),抑(yi)制了抗(kang)體(ti)和(he) NC 膜檢測線(T 線)上的克倫特羅—BSA 偶聯物的結合(he),從而導致檢測線顏色深淺的變化。當樣本(ben)中(zhong)沒有克倫特羅(luo)或克倫特羅濃度低于檢測限時,T線顯色;當樣本中的克倫特羅(luo)濃度(du)等于或高于檢(jian)測限時,T線不(bu)顯色;而無論樣本中是否含有克倫特羅,質控(kong)線(C 線)都會顯色,以示檢測有效。
2 適用范(fan)圍
本產品適用于(yu)尿液、組織、飼料樣本中克倫特羅的定(ding)性檢測。
3 檢(jian)出限
1)尿樣(yang): 3ng/mL(3ppb);
2)組織: 3ng/g(3ppb);
3)飼料: 3ng/g(3ppb)。
4 產品組成
1)克倫(lun)特羅膠體金試紙(zhi)卡(20支);
2)一(yi)次性吸管(guan)(20支);
3)說明書(shu)(1份)。
5 樣本前(qian)處(chu)理方法
5.1尿樣(yang)樣(yang)本處理方法如下:
1)直接(jie)取澄(cheng)清新鮮無污染(ran)尿(niao)樣(yang)待檢(注(zhu)意:尿(niao)樣(yang)不要在冷(leng)藏后(hou)立即(ji)進行檢測。尿(niao)樣(yang)樣(yang)本必須收集在潔凈、干燥、不含有(you)任(ren)何防腐劑的塑料尿(niao)杯或(huo)玻璃容器內,如尿(niao)樣(yang)混濁,可(ke)在室溫4000r/分鐘(zhong)條件下離心5分鐘處(chu)理后待檢(jian)。如(ru)尿樣樣本不能及時檢(jian)測,可于(2~8)℃冷藏保存(cun)24小時,長期保存(cun)需冷凍 -20℃,切忌反復(fu)凍融樣本)。
5.2組織樣(yang)本方法一處理方法如下:
1)稱取(5.0±0.05)g勻(yun)質的肌肉組織樣本于(yu)50mL塑料離(li)心管中,固定在漂(piao)浮泡沫(mo)墊上(shang)置于(yu)90℃以(yi)上(shang)水(shui)浴鍋中水(shui)浴10分鐘;
2)冷卻至(zhi)常溫后,取(2~3)滴煮出(chu)的溶液檢測(盡量(liang)吸取肉汁中上清)。
5.3組織樣本(ben)方(fang)法二(er)處理方(fang)法如(ru)下:
1)稱取(qu)(5.0±0.05) g組(zu)織,加入(ru)5g無(wu)水硫酸鈉(na),再(zai)加入(ru)5mL乙腈,振蕩3分鐘,在4000r/分鐘的條件下離心10分鐘;
2)取(qu)4mL上清液于(yu)潔凈試管,56℃水浴空氣流或(huo)氮氣流吹干(gan)后用(yong)0.3mL純凈水復(fu)溶(rong),振蕩(dang)混合1分鐘,溶(rong)解后的液體直接用(yong)于(yu)檢測。
5.4飼料樣(yang)本處理方法如下:
1)稱取(qu)(5.0±0.05 )g飼料,加入10mL純凈水,再(zai)加入5mL乙(yi)(yi)酸乙(yi)(yi)酯,振蕩(3~5)分鐘,4000r/分鐘離心(xin)10分鐘(zhong);
2)取2mL上清液于(yu)潔(jie)凈試管,56℃水浴空氣流或氮氣流吹干后,加入0.3mL純凈水與2mL正己烷,振(zhen)蕩1分鐘,4000r/分鐘離心(xin)5分(fen)鐘(zhong),除去上層液(ye)體,取(qu)下層液(ye)體2滴檢(jian)測。
注(zhu):克倫特羅、萊克多巴(ba)胺、沙丁(ding)胺醇組(zu)織和飼料樣(yang)品可以(yi)處理后三個項目進行同(tong)時(shi)檢(jian)測。
6 操作步(bu)驟
1)從(cong)原(yuan)包裝(zhuang)袋中取出(chu)試紙卡,打開后請(qing)在一個(ge)小時內盡快使用;
2)用一次性吸管吸取待檢樣(yang)本垂直滴加 (2~3)滴(約 70uL)于加樣孔(kong)中;
3)液體(ti)流(liu)動(dong)時(shi)開始計(ji)時(shi),反應 (5~8)分鐘后,根據示意圖判定結果。其他時間(jian)判定無效。
7 結果判(pan)斷
根(gen)據顯色不同,可作如下定(ding)性判斷(如圖1所(suo)示):
1) 陰性(xing)(-):C 線顯色:T 線(xian)顯色(se)(與C線比較),均表示樣本中克倫特(te)羅濃度低于檢出限;
2)陽性(+):C 線顯色,T 線不顯色,均表示樣本中克倫(lun)特羅濃度(du)等(deng)于或高于檢(jian)出(chu)限(xian);
3)無效:未出現 C 線,表明不正確的操作過程或試紙卡已失效。在此情況下,應再次仔細閱讀說明書,并用新的試紙卡重新測試。
8 注意事項
1)請(qing)按照操作步驟進行測試(shi),盡量不(bu)要觸摸試(shi)紙(zhi)卡中央的白(bai)色膜面,檢測時(shi)避免(mian)陽光直射;
2)本試紙卡為一次(ci)性(xing)產(chan)品,請勿重復使用;
3)本產品檢測(ce)結果僅供(gong)參考,如需確證,請參照國家相(xiang)關標準方(fang)法。
9 特(te)異性
1)本(ben)產品與萊(lai)克(ke)多巴(ba)胺(an)、苯(ben)乙醇胺(an)A、多巴酚丁胺等β-受體激動劑藥物無交叉反應,除上述三種β-受體(ti)激動(dong)劑藥物(wu)外其(qi)他(ta)β-受體(ti)激動(dong)劑類藥物(wu)交叉未知;
2)本產品與氯(lv)霉(mei)素(su)、鏈霉(mei)素(su)、四環素(su)、磺胺(an)類、喹諾酮(tong)類等(deng)其他種類藥物無交叉反應。
10 儲存(cun)及有效期
1)儲存條件:儲存試紙卡于 4℃~20℃陰涼避光干燥環境中;
2)有效(xiao)期:該產(chan)品有效(xiao)期為 12 個月。