沙丁胺醇膠體金試紙卡——瘦肉精三項檢測
1 檢測原理
沙丁(ding)胺(an)醇(chun)膠體金試(shi)紙卡(ka)應用(yong)了(le)競(jing)爭(zheng)抑制免疫(yi)層析(xi)的原理(li),樣本(ben)中(zhong)的沙丁胺醇在流(liu)動過程中(zhong)與膠(jiao)體(ti)金(jin)標記的特異性(xing)單克(ke)隆抗(kang)體(ti)結(jie)合(he),抑制(zhi)了抗(kang)體(ti)和(he) NC 膜檢測線(T 線)上的沙丁(ding)胺醇—BSA 偶聯物的(de)結(jie)合,從而(er)導致檢測線(xian)顏色深淺的(de)變化(hua)。當樣本中(zhong)沒有沙丁胺醇或沙丁胺醇濃度低于檢測限(xian)時,T 線顯色;當樣本中的沙丁(ding)胺醇濃度等于或高(gao)于檢測限時,T線不顯色;而無論樣本(ben)中是(shi)否含有沙丁胺(an)醇,質(zhi)控(kong)線(xian)(C 線)都會顯色,以示檢測有效。
2 適用范圍
本產(chan)品適(shi)用(yong)于尿液、組織、飼料樣本中沙丁胺醇的定性檢測。
3 檢出限
1) 尿樣: 5ng/mL(5ppb);
2) 組織(zhi): 3ng/g(3ppb);
3) 飼(si)料(liao): 3ng/g(3ppb)。
4 產(chan)品組成
1)沙丁胺醇膠體(ti)金(jin)試(shi)紙卡(ka)(20支);
2)一(yi)次性吸管(20支);
3)說明(ming)書(1份)。
5 樣本(ben)前處理(li)方法
5.1尿(niao)樣樣本(ben)處(chu)理方法如下:
1)直(zhi)接取澄清新鮮無污染尿(niao)樣(yang)待檢(注意:尿(niao)樣(yang)不要在冷藏后立(li)即進(jin)行檢測。尿(niao)樣(yang)樣(yang)本必須收集在潔凈、干燥、不含有(you)任(ren)何防腐劑的塑料尿(niao)杯或玻璃(li)容器內,如(ru)尿(niao)樣(yang)混濁,可在室溫4000r/分(fen)鐘條件下離(li)心5分鐘處理后待檢(jian)。如尿樣樣本不能及時檢(jian)測,可于(yu)(2~8)℃冷(leng)藏(zang)保(bao)存(cun)24小時,長期(qi)保(bao)存(cun)需冷(leng)凍 -20℃,切忌反復凍融樣本(ben)。)
5.2組織(zhi)樣本方法一處理方法如(ru)下:
1)稱(cheng)取(5.0±0.05)g勻質(zhi)的肌(ji)肉組織樣本于50mL塑料離(li)心管中,固定在漂浮泡沫(mo)墊上(shang)置于90℃以上(shang)水浴鍋中水浴10分鐘(zhong);
2)冷卻至常(chang)溫(wen)后,取(2~3)滴煮(zhu)出(chu)的溶液檢測(ce)(盡量吸取肉(rou)汁中上清(qing))。
5.3組織樣本方法二處理(li)方法如下:
1)稱取(5.0±0.05) g組織,加(jia)入5g無水硫酸鈉,再加(jia)入5mL乙腈,振蕩3分鐘(zhong);在4000r/分鐘(zhong)的(de)條件(jian)下離心10分鐘(zhong);
2)取4ml上清液于潔凈試管(guan),56℃空氣流或氮氣流吹干后用(yong)0.3mL純凈水復溶,振(zhen)蕩混合(he)10分鐘(zhong),溶解后的液體直接用(yong)于檢測。
5.4飼料樣(yang)本處理方法(fa)如下(xia):
1)稱取(5.0±0.05) g飼(si)料,加入10mL純凈水,再加入5mL乙酸(suan)乙酯,振蕩(dang)(3~5)分鐘,4000r/分鐘(zhong)離心10分鐘;
2)取2mL上清(qing)于潔凈試管,56℃空(kong)氣(qi)(qi)流或氮(dan)氣(qi)(qi)流吹(chui)干后(hou),加入0.3mL純凈水與2mL正(zheng)己烷,振蕩1分鐘(zhong),4000r/分鐘離心(xin)5分(fen)鐘,除去(qu)上層(ceng)液(ye)體(ti),取(qu)下層(ceng)液(ye)體(ti)2滴檢測。
注(zhu):克倫特(te)羅、萊克多巴胺、沙丁胺醇組織和(he)飼料樣品(pin)可以處理(li)后(hou)三個項目進行(xing)同時(shi)檢(jian)測(ce)。
6 操作(zuo)步(bu)驟
1)從原(yuan)包裝袋中取(qu)出(chu)試紙卡,打開后請在一個小時內(nei)盡快(kuai)使用;
2)用一次(ci)性吸管吸取待檢樣(yang)本垂直滴加 (2~3)滴(約(yue) 70uL)于加樣孔中;
3)液體流動(dong)時開(kai)始計時,反應 (5~8)分鐘后,根據(ju)示意圖判定結果。其(qi)他時間判(pan)定無效。
7 結果判斷(duan)
根(gen)據顯(xian)色(se)不同,可(ke)作如下定性判斷(如圖1所(suo)示):
1)陰性(-):C 線顯色,T 線顯色(與C線(xian)比較),均表示(shi)樣本(ben)中沙丁胺醇濃(nong)度低于檢出限(xian);
2)陽(yang)性(+):C 線顯色,T 線不顯色,均表示樣本中沙丁胺醇濃度等于或高于檢出(chu)限(xian);
3)無(wu)效(xiao):未出現 C 線,表明不正確的操 作過程或(huo)試紙卡(ka)已失效。在此情況(kuang)下(xia),應再次仔(zi)細閱讀說明書,并用(yong)新(xin)的試紙卡(ka)重新(xin)測試。
8 注(zhu)意事項
1)請(qing)按(an)照操作步驟(zou)進行(xing)測(ce)試,盡量(liang)不要觸(chu)摸試紙卡(ka)中央的白色膜面,檢測(ce)時避免陽光直射;
2)本試紙卡(ka)為一次性產品,請(qing)勿重復使用;
3)本產品檢測(ce)結果僅(jin)供參考,如(ru)需確證,請參照國家相(xiang)關(guan)標準(zhun)方法。
9 特(te)異性
1)本產(chan)品(pin)與萊克(ke)多巴胺(an)、苯乙(yi)醇胺(an)A、多巴酚丁胺等β-受體激動劑藥物無交叉反應,除上述三種(zhong)β-受體激(ji)動(dong)劑(ji)藥(yao)物外(wai)其他β-受體激(ji)動(dong)劑(ji)類(lei)藥(yao)物交叉未知;
2)本產品與氯霉(mei)素(su)、鏈霉(mei)素(su)、四(si)環素(su)、磺(huang)胺(an)類(lei)、喹諾(nuo)酮類(lei)等其他種類(lei)藥物無交叉反應。
10 儲存及有效(xiao)期(qi)
1)儲(chu)存條件(jian):儲(chu)存試紙卡(ka)于 4℃~20℃陰涼避光干燥環境中;
2)有效期:該(gai)產(chan)品有效期為 12 個月。